保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融
英文名称：CF 532 Tyramide Conjugates
中文名称：CF 532 酪胺共轭物；CF488A 酪胺结合物
激发波长：527 nm
发射波长：558 nm
外观：固体粉末
溶解性：溶于水、DMSO等极性溶剂
规格：5mg，10mg，25mg
纯度：95%+
展开剩余82%二、功能结构与组成CF 532 Tyramide Conjugates的核心结构包括：
荧光基团（CF 532染料）：属于Biotium的CF染料系列，是一种高亮度、光稳定性强的荧光素衍生物，其激发/发射波长约为527 nm/558 nm（与Alexa Fluor 532光谱特性相似）。
酪胺基团：通过酰胺键或碳酰胺键与荧光基团连接，含有苯环羟基（-OH）和乙氨基（-NH₂）。在辣根过氧化物酶（HRP）催化下，酪胺被氧化为高活性自由基，可与靶标蛋白或核酸附近的酪氨酸残基共价结合。
连接臂：通常采用琥珀酰亚胺酯（NHS ester）等化学基团，确保偶联反应的特异性和稳定性。
基本特性
光学性能：
高摩尔吸光系数（ε > 100,000 M⁻¹cm⁻¹）和量子产率（Φ > 0.9），亮度高于传统染料（如FITC）。
优异的光稳定性，适合长时间成像或多轮扫描。
化学反应特性：
通过HRP催化过氧化氢产生氧自由基，激活酪胺基团，实现信号放大（灵敏度可达传统方法的100倍）。
共价结合靶标，形成稳定标记，减少背景信号。
三、CF 532 Tyramide Conjugates的多色成像与多重分析过程分别是什么？（一）多色成像过程
多色成像通过循环染色策略实现，核心步骤包括：
样本预处理：福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）组织切片需经脱蜡、抗原修复（如微波加热 citrate 缓冲液）及内源性过氧化物酶阻断。
第一轮染色：
孵育一抗（针对目标蛋白 A）后，加入 HRP 标记的二抗
添加 CF 532 Tyramide 工作液（含 H2O2），HRP 催化酪胺自由基共价沉积在目标蛋白附近，形成稳定荧光信号（激发/发射波长约 532/553 nm）。
HRP 失活与抗体剥离：
用 NaN₃ 或热化学法（如 80°C 缓冲液处理）灭活 HRP，并剥离一抗/二抗复合物。
循环重复：
更换下一靶点的一抗，重复步骤 2-3，依次使用不同荧光酪胺（如 CF 488、CF 647）标记其他蛋白。
成像：
使用多通道荧光显微镜或全光谱成像系统采集各通道图像，并通过光谱解混技术分离信号。
（二）多重分析过程
多重分析侧重于图像处理与定量：
图像配准与分割：
将多轮成像图像对齐（配准），并基于细胞核标记（如 DAPI）进行细胞分割。
信号定量：
使用分析软件量化各通道荧光强度，识别细胞类型及蛋白共定位。
空间分析：
分析细胞间相互作用（如免疫细胞浸润肿瘤区域）或组织微环境结构。
关键优势
高灵敏度：TSA 可检测低丰度靶标（灵敏度达传统方法 100 倍）。
多色兼容性：CF 532 与其他荧光酪胺（如 CF 488、CF 647）光谱重叠小，适合 4-7 色多重面板。
同种属抗体兼容：通过抗体剥离可多次使用同种属一抗，简化实验设计。
四、关联试剂Alexa Fluor 555 WGA
Rhodamine Red-Maleimide
ATTO 488 Maleimide
IRDye 800CW Maleimide
CF568-Streptavidin conjugate
CF633-Streptavidin conjugate
Fluo-3 AM (钙离子荧光探针, 5mM)
Lysosome Tracker Green，溶酶体绿色荧光探针
钙离子荧光探针 Fura 2-AM/FURA-2AM
Mito-Tracker Deep Red FM（线粒体红色荧光探针）
（本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理）
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